Dans la PCR, quelle étape nécessite une enzyme thermostable ?

Table des matières:

Dans la PCR, quelle étape nécessite une enzyme thermostable ?
Dans la PCR, quelle étape nécessite une enzyme thermostable ?

Vidéo: Dans la PCR, quelle étape nécessite une enzyme thermostable ?

Vidéo: Dans la PCR, quelle étape nécessite une enzyme thermostable ?
Vidéo: C'est quoi la PCR ? Principe et Applications | Biochimie Facile 2024, Mars
Anonim

Taq polymérase Comme la réplication de l'ADN dans un organisme, la PCR nécessite une enzyme ADN polymérase qui fabrique de nouveaux brins d'ADN, en utilisant les brins existants comme modèles. L'ADN polymérase généralement utilisée dans la PCR est appelée polymérase Taq, du nom de la bactérie tolérante à la chaleur à partir de laquelle elle a été isolée (Thermus aquaticus).

Pourquoi une ADN polymérase thermostable est-elle nécessaire pour la PCR ?

aquaticus est une bactérie qui vit dans les sources chaudes et les cheminées hydrothermales, et la Taq polymérase a été identifiée comme une enzyme capable de résister aux conditions de dénaturation des protéines (haute température) requises PCR.

Quelle étape est utilisée dans la PCR enzymatique thermostable ?

Une ADN polymérase thermostable est utilisée dans cycles répétés d'hybridation d'amorces, de synthèse d'ADN et de dissociation d'ADN duplex pour servir de nouvelles matrices. L'amplification théorique de l'ADN matrice, en supposant que les réactifs ne sont pas limitants et que l'enzyme maintient sa pleine activité, est de 2 où n est le nombre de cycles.

Dans quelles étapes de la PCR les enzymes sont-elles utilisées ?

Trois étapes de PCR─dénaturation, annelage et extension─comme indiqué dans le premier cycle, et l'amplification exponentielle de l'ADN cible avec des cycles répétés.

Quelle enzyme est utilisée pour l'amplification en PCR ?

Taq ADN polymérase est couramment utilisée pour amplifier les produits PCR de 5 kb ou moins. Les produits PCR dans la plage de 5 à 10 kb peuvent être amplifiés avec l'ADN polymérase Taq, mais nécessitent souvent une optimisation plus poussée que les produits PCR plus petits.

Conseillé: